Se você procura uma menção bíblica do sinal da cruz não encontrará. Da mesma maneira, tantas outras práticas cristãs não são mencionadas na Bíblia, mas mesmo assim elas têm um fundamento bíblico. Assim é com o sinal da cruz.
A sua base está no fato que a cruz é a expressão da salvação trazida por Deus aos homens: através dela fomos redimidos e ganhamos a salvação.
Já no segundo século da tradição cristã, comum tanto a católicos quanto a outros cristãos, os Padres da Igreja mencionam o uso do sinal da cruz, especilamente a ação de traçar uma cruz na fronte das pessoas. Assim como o praticamos hoje parece que começou a ser usado a partir do V século.
São importantes também as palavras ditas junto com o sinal. Normalmente se diz a fórmula trinitária "em nome do Pai, do Filho e do Espírito Santo". No passado se usava também "Senhor abre meus lábios". A tradição grega costuma dizer junto com o sinal a frase "Santo Deus, Santo forte, Santo imortal, tem piedade de nós".